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PRODUCTS CNTER當前位置:首頁產品中心分子生物學平臺分子生物學實驗實驗外包慢病毒轉染穩轉細胞系構建
慢病毒構建并包裝后,以進行貼壁細胞或懸浮細胞的轉染。具體流程如下:1. 對慢病毒基因進行改造,即敲除U3端的400bp的特定基因,使其逆轉錄和整合的能力,但保留產生病毒顆粒必須的蛋白的能力。2. 向上述基因中插入目的基因。與具有包裝功能的質粒同時進行對包裝細胞的轉染。在細胞上清中獲得攜帶目的基因的復制缺陷型慢病毒載體顆粒。
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ARTICLES慢病毒構建并包裝后,以進行貼壁細胞或懸浮細胞的轉染。具體流程如下:
1. 對慢病毒基因進行改造,即敲除U3端的400bp的特定基因,使其逆轉錄和整合的能力,但保留產生病毒顆粒必須的蛋白的能力。
2. 向上述基因中插入目的基因。與具有包裝功能的質粒同時進行對包裝細胞的轉染。在細胞上清中獲得攜帶目的基因的復制缺陷型慢病毒載體顆粒。
3. 使用上述獲得的慢病毒顆粒轉染目的細胞。
4. 根據慢病毒攜帶的標記基因,轉染得到的細胞進行熒光蛋白檢測或加入抗生素進行細胞篩選。
5. 熒光性強或者克隆數多的細胞系加以傳代培養并保存。
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