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TECHNICAL ARTICLES表面等離子共振分析(Surface Plasmon Resonance Analysis, SPR)是一種檢測生物分子間相互作用的先進技術,它基于金屬表面與光相互作用產生的表面等離子體波現象。SPR技術能夠實時監測生物分子間的結合與解離過程,無需標記,具有高靈敏度和實時性,廣泛應用于生物分子相互作用分析、藥物篩選、臨床診斷等領域。
SPR技術的核心原理是利用全內反射條件下入射光在金屬表面產生的消逝波與金屬中的自由電子共振,形成表面等離子體波。當生物分子在金屬表面結合時,會改變局部折射率,從而引起SPR角度的變化,通過測量這種變化可以定量分析生物分子的結合情況。
在實驗操作中,SPR技術通常包括配體的固定、樣品的進樣、數據的采集和分析等步驟。例如,Biacore儀器是SPR技術中常用的設備,它通過傳感器芯片表面偶聯的配體與分析物的相互作用,實時記錄結合和解離過程,進而分析分子間的親和力和動力學參數。
SPR技術的優勢在于它可以提供豐富的信息,包括結合親和力、動力學常數、特異性結合等,而且實驗過程簡單、快速。此外,SPR技術還具有無需標記、無需純化樣品、可以實時監測等優點,使其成為生物分子相互作用檢測的“金標準"。
然而,SPR技術在實驗設計和數據分析時也需要特別注意,比如需要考慮樣品的純度、活性、是否存在非特異性結合等因素,以及如何選擇合適的參考通道來扣除非特異性信號等。
總的來說,SPR技術是一種強大的分析工具,已經在多個領域得到應用,如蛋白質-蛋白質、蛋白質-小分子化合物、蛋白質-核酸等相互作用的研究,并且隨著技術的發展,其應用范圍還在不斷擴展。
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