技術文章
TECHNICAL ARTICLES單克隆抗體/雜交瘤細胞定制服務
雜交瘤技術的基本原理是通過融合兩種細胞而同時保持兩者的主要特征。這兩種細胞分別是經抗原免
疫的免疫動物脾細胞(如小鼠B淋巴細胞)和具有永生功能的腫瘤細胞(如小鼠骨髓瘤細胞)。被特異性
抗原免疫的免疫動物脾細胞( B淋巴細胞)的主要特征是它的抗體能夠分泌產生結合抗原特定位置(表
位)的抗體,但其自身不能在體外連續培養,具有永生功能的腫瘤細胞(骨 髓瘤細胞)則可在培養條件下
無限分裂、增殖,即具有所謂永生性。在選擇培養基的作用下,只賄由一個B淋巴細胞與一個骨髓瘤細胞
融合的雜交瘤細胞才能具有持續培養的能力,形成同時具備抗體分泌功能和保持細胞永生性兩種特征的細
胞克隆。理論上,我們認為一個免疫后的B淋巴細胞只分泌產生一種抗體,而一個雜交瘤細胞只包含一個B
淋巴細胞,所以增值后的雜交瘤細胞均來自一各克隆,因此產生的抗體就是單克隆抗體。
本公司提供quanfangwei的抗原分析服務,為海一位客戶精心打造的方案, 全面評估實驗風險,提出zui合理
的實驗建議。無論是采用多肽設計合成,還是原真核蛋白表達目的抗原,我們yiliu的抗體制備技術團隊都
會深入每個實驗細節,憑借多年的試驗項目經驗,有效規避實驗風險,切實提高成功概率。免疫受試動
物,均為SPF級飼養環境培育,遺傳背景清楚,免疫應答迅速,抗體的專-性與結合力均為同行內
lingxianzhe。實驗技術人員全部具有研究生以上學歷,全部熟稔大規模抗體雜交瘤細胞篩選技術流程,能根據客戶
的各種需求改進制備工藝。憑借業內lingxian的制備工藝,于同行的免疫動物數量,我們擁有業內最深的雜
交瘤細胞群探測深度與精準度,通過快速篩選,我們制備的抗體不僅能實現WB,ELISA等常 規實驗需
要,對于客戶需要的更高制備難度的IHC、IF、 IP等試驗,同樣可以有效檢出滿足要求的功能性雜交瘤細
胞。
大鼠源單克隆抗體定制服務(Rat Monoclonal Antibody Service)
注:
●于受試動物較為脆弱,制備工藝復雜,為防止實驗意外,本公司大鼠單抗制備免疫數量一 般最少2
只,
●所有的大鼠單抗制備項目,如果由親和純化改為抗原特異性親和純化,價格增加500元;
●我方對于原真核蛋白從頭制備服務,可提供免費的蛋白結構分析與密碼子優化服務。
●以上價格均為目錄報價,實際價格以項目實際為準
經典案例(Rat Monoclonal Antibody Service)
客戶:提供蛋白抗原質粒\蛋白信息
制備流程:
1)抗原制備\質粒表達蛋白純化多肽設計合成及交聯
2)免疫小鼠:兔疫LOU/c大鼠2只
3) ELISAWestern- blot試驗監控小鼠血清中的抗體效價和特異性,根據EL ISA和WB檢測,篩選大鼠
4)細胞融合
5)陽性篩選:對雜交瘤上清進行EL ISA檢測,篩選出抗體陽性的雜交瘤細胞克隆
6)亞克隆:陽性克隆通過有限稀釋法進行亞克隆,提供單克隆上清給客戶檢測
7)腹水制備:采用大鼠腹腔接種法進行雜交瘤培養物的腹水生產
8)抗體純化:純化2株單克隆雜交瘤細胞分泌抗體
交付產品(每種抗原、2只大鼠一共的)
1) 2~3株針對免疫原特異性的單克隆雜交瘤細胞株
2)每個細胞株各提供10ml (1mg/ml) 純化的抗體,Elisa效價應至少1:50,000以 上; WB內源檢測陽性
3)剩余的抗原,完整的實驗報告
制備時間: 3~6個月
北京大興亦莊經濟開發區天驥智谷62號樓603
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